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腫瘤類器官簡述
引言 2009年,Hans Clevers和其實驗室的博士后Toshiro Sato用來源于小鼠腸道的成體干細胞培育出首個微型腸道類器官,掀起了類器官研究的熱潮。2011年,Sato等運用類器官技術率先建...
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類器官培養專欄
2024-04-19
類器官培養常見問題解答
一、細胞準備篇 1、 組織消化選擇什么消化液,消化多長時間? 答:組織的消化液有兩種,一種是 EDTA, 另一種是膠原酶,EDTA 適合消化空腔性器官,例如小腸和胃;膠原酶消化應該比較廣泛,一般會搭配 DNA 酶...
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類器官培養專欄
2024-04-24
免疫熒光和流式方案
小腸、胃類器官的免疫熒光染色方法 1、吸去培養板孔內的培養液,用 PBS 清洗三次,棄去 PBS; 2、往基質膠孔內加入 4%多聚甲醛固定 15 min; 3、用 PBS 清洗三次,用亞甲基藍將基質膠染色以便...
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類器官培養專欄
2024-04-24
小鼠胃類器官的培養
胃類器官是一種衍生于胃干細胞或者多能誘導干細胞的類器官模型,體外培養的胃類器官含有多種細胞克隆亞群,其培養環境模擬活體內的真實微環境,因此胃類器官在細胞成分、組織構架及特定功能等方面與胃上皮組織高度相似,可實現在體外培養...
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類器官培養專欄
2024-04-24
小鼠小腸類器官培養方案
2009年,荷蘭科學家Hans Clevers的團隊成功地在體外將Lgr5+腸道干細胞培養成包括隱窩樣區域和絨毛樣上皮區域的三維結構,即小腸類器官,這一結構包含所有終末分化細胞類型,能準確模擬腸道上皮生理情況,這一方法的...
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類器官培養專欄
2024-04-24
小鼠結腸類器官培養方案
一、 分離小鼠結腸隱窩 1、腹腔麻醉后采用頸椎脫臼法處死小鼠,浸泡于體積分數為 75%的酒精中 5 min;解剖小鼠取結腸 5cm(結腸取材應從盲腸下方 0.5 cm,直腸上方 0.5 cm 位置截取),將腸段放入 ...
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2024-04-24
人肝臟干細胞來源肝臟類器官的培養方法
2014 年Hans.Clever 團隊從手術切除的原代肝組織中分離細胞并通過表面標記EPCAM 篩選細胞,使用細胞外基質膠Matrigel,結合細胞因子和小分子化合物的三維類器官培養方法成功的在體外大量擴增了具有...
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2024-04-24
人多能性干細胞來源肝臟類器官的培養方法
引言: 人肝臟類器官以hESCs/iPSCs 為來源,將其誘導到定型內胚層,再誘導肝譜系特化的階段(HS),將細胞植入細胞外基質膠中,并且添加類器官培養成分Advanced DMEM/F12 、N2 、B27 、N...
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2024-04-24
人多能誘導干細胞來源腎臟類器官的培養方法
引言: 腎臟類器官的培養首先用高濃度的CHIR99021刺激HIPSC進行2D培養,促進其向原條中胚層分化,隨后加入CHIR99021、FGF-9因子誘導其向間介中胚層分化;最后將細胞團轉入Transwell小室內...
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類器官培養專欄
2024-04-24
從人ESCsiPSCs誘導腦類器官
過去,中樞神經系統(CNS)藥物研究主要依賴于嚙齒動物模型或細胞體外模型等傳統方法。由于人類和嚙齒類動物間的物種差異,所獲得的數據難以真實地模擬神經發育和疾病機制等。隨著干細胞技術的發展,培養人大腦類器官成為目...
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2024-04-24
成人小腸類器官的培養與分化
2011年,Hans Clevers等首先報道了成人小腸類器官的構建方法,培養及分化的人小腸類器官分別具有小腸上皮組織隱窩和絨毛區域細胞的特征,小腸類器官與小腸上皮組織在細胞組成和形態結構上高度相似,...
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2024-04-24
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